E-液状キット 酢酸

自動分析装置(自動吸光度測定機器)
食品およびその他の試料中の酢酸の吸光度定量用試薬

E-液状キット 酢酸 製品情報

オーダーインフォメーション

カテゴリ 有機酸
製品番号 E5226 製品名 E-液状キット 酢酸
ENZYTEC fluid Acetic acid
包装単位 20ml,5ml各4本(自動分析80回×4本)測定用 希望価格 価格表ダウンロード
測定法 UV法 保存方法 要2~8℃保存
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方法

酢酸キナーゼ(AK)を用いた酵素法およびUV法

測定原理


保存条件および試薬の安定性

コンタミを避け、+4℃で保存した場合、試薬類は表示の有効期限の月末まで安定です。凍結はしないで下さい。

警告および使用上の注意

  1. 試薬は保存剤としてアジ化ナトリウム(0.95g/l)を含んでいます。飲み込まないようご注意下さい。また皮膚や粘膜に触れないようご注意下さい。
  2. 研究用試薬を使用する場合に必要な使用上の注意をお守り下さい。

試薬調製

試薬類および標準液はそのまま直ぐに使用できます。

追加(添付はされておりませんが測定に必要なもの)

蒸留水(無菌状態で重金属を含有してない)および一般的な実験用器具を使用します。

包装内容および試薬濃度

R1 4×20
ml
バッファー
D-グルコース
酢酸キナーゼ(AK)
ホスフォトランスアセチラーゼ(PTA)
ADP依存ヘキソキナーゼ(ADP-HK)
グルコース-6-リン酸脱水素酵素
(G6P-DH)
pH8
10mmol/l
≥2kU/l
≥6kU/l
≥300U/l
≥4kU/l
 
R2 4×5
ml
バッファー
NAD
ATP
コエンザイムA(CoA)
pH6.5
≥15mmol/l
≥5mmol/l
≥0.3mmol/l

自動分析装置(自動吸光度測定機器)の操作法

波長:340nm(主)/415nm(副、二波長測定)
光路長:1.00cm
温度:37℃
測定対照:試薬ブランク

標準液 試料
ブランク
試料又は、標準液
試料又はキャリブレーター
蒸留水
試薬1(R1)

4μl
240μl
4μl

240μl
混和し、300秒間インキュベーションします。
試薬2(R2) 60μl 60μl
混和し、200秒間インキュベーション後、吸光度(A1)を測定します。
更に120秒間インキュベーション後、吸光度(A2)を測定します

計算

RBを使用して測定した場合
 ΔA=[(A2-A1)試料又は標準液]-[(A2-A1)試料ブランク]

キャリブレーション(校正)用および測定用コントロール

自動吸光度測定システムの用、ならびに精度および正確度管理用内部標準として、自動分析用 マルチ有機酸スタンダードCat. No.E1241、1×9ml)をご使用下さい。標準液(スタンダード)はそのまま使用できます。

測定品質の管理

精密性、正確性の管理用内部標準としてコントロール試料を使用することは適切な操作方法です。研究室の要望によって測定品質、内部管理の頻度や許容限界が決められます。測定結果は、定められた許容限界内に入るようにします。

特定の範囲から測定結果が外れた場合のために、トラブルシューティング用手順を定めて記述しておく必要があります。

基準範囲

本法では、酢酸濃度1200 mg/l まで測定範囲を広げられます。この範囲を超えた場合は蒸留水で希釈します。標準液(キャリブレーター)の希釈率は記憶にとどめて置きます。

特異性

本法では酢酸に特異的です。クエン酸2.5g/l まで、アスコルビン酸1.0g/lまで、酒石酸3.5g/lまでは、阻害しません。

最小検出限界

最小検出限界は最小酢酸検出濃度でゼロと区別されています。酢酸を含まない試料を20回測定し、その標準偏差値を3倍した数値に相当します。

相関

E-液状キット 酢酸(y)と市販の用手法テスト(x)の比較(26サンプル)ではy=0.947x+7.4g/l r=0.991の結果が得られました。

データ

正確性

正確性 n 平均値
[mg/l]
SD
[mg/l]
C
[%]
赤ワイン 20 459 2.71 0.59
白ワイン 20 155 1.86 1.20
酢酸溶液 20 98 1.53 1.56

日差変動

日差変動(5日間) n 平均値
[mg/l]
SD
[mg/l]
C
[%]
酢酸 204mg/l 20 208 7.01 3.37
酢酸 108mg/l 20 107 4.12 3.85
酢酸 301mg/l 20 306 8.08 2.64
赤ワイン 20 569 9.31 1.64
白ワイン 20 214 5.49 2.56

発泡ワインの回収率は、下記の表の通りです(ワイン:酢酸液=9:1)

回収率n=5 平均値
[mg/l]
定濃度
[mg/l]
回収率
[%]
9+1:
白ワイン1+500mg/l
56 53 106
9+1:
白ワイン1+1000mg/l
106 100 106
9+1:
白ワイン1+2000mg/l
214 200 107
9+1:
赤ワイン1+500mg/l
51 53 96
9+1:
赤ワイン1+1000mg/l
96 100 96
9+1:
赤ワイン1+2000mg/l
189 200 94
9+1:
赤ワイン2+500mg/l
54 53 102
9+1:
赤ワイン2+1000mg/l
100 100 100
9+1:
赤ワイン2+2000mg/l
199 200 99
9+1:
白ワイン2+500mg/l
54 53 102