カテゴリ | 有機酸 | ||
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製品番号 | E5226 | 製品名 | E-液状キット 酢酸 ENZYTEC fluid Acetic acid |
包装単位 | 20ml,5ml各4本(自動分析80回×4本)測定用 | 希望価格 | 価格表ダウンロード |
測定法 | UV法 | 保存方法 | 要2~8℃保存 |
資料ダウンロード |
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酢酸キナーゼ(AK)を用いた酵素法およびUV法
コンタミを避け、+4℃で保存した場合、試薬類は表示の有効期限の月末まで安定です。凍結はしないで下さい。
試薬類および標準液はそのまま直ぐに使用できます。
蒸留水(無菌状態で重金属を含有してない)および一般的な実験用器具を使用します。
R1 | 4×20 ml |
バッファー D-グルコース 酢酸キナーゼ(AK) ホスフォトランスアセチラーゼ(PTA) ADP依存ヘキソキナーゼ(ADP-HK) グルコース-6-リン酸脱水素酵素 (G6P-DH) |
pH8 10mmol/l ≥2kU/l ≥6kU/l ≥300U/l ≥4kU/l |
R2 | 4×5 ml |
バッファー NAD ATP コエンザイムA(CoA) |
pH6.5 ≥15mmol/l ≥5mmol/l ≥0.3mmol/l |
波長:340nm(主)/415nm(副、二波長測定)
光路長:1.00cm
温度:37℃
測定対照:試薬ブランク
標準液 | 試料 ブランク |
試料又は、標準液 |
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試料又はキャリブレーター 蒸留水 試薬1(R1) |
- 4μl 240μl |
4μl - 240μl |
混和し、300秒間インキュベーションします。 | ||
試薬2(R2) | 60μl | 60μl |
混和し、200秒間インキュベーション後、吸光度(A1)を測定します。 | ||
更に120秒間インキュベーション後、吸光度(A2)を測定します |
RBを使用して測定した場合
ΔA=[(A2-A1)試料又は標準液]-[(A2-A1)試料ブランク]
自動吸光度測定システムの用、ならびに精度および正確度管理用内部標準として、自動分析用 マルチ有機酸スタンダード(Cat. No.E1241、1×9ml)をご使用下さい。標準液(スタンダード)はそのまま使用できます。
精密性、正確性の管理用内部標準としてコントロール試料を使用することは適切な操作方法です。研究室の要望によって測定品質、内部管理の頻度や許容限界が決められます。測定結果は、定められた許容限界内に入るようにします。
特定の範囲から測定結果が外れた場合のために、トラブルシューティング用手順を定めて記述しておく必要があります。
【基準範囲】
本法では、酢酸濃度1200 mg/l まで測定範囲を広げられます。この範囲を超えた場合は蒸留水で希釈します。標準液(キャリブレーター)の希釈率は記憶にとどめて置きます。
【特異性】
本法では酢酸に特異的です。クエン酸2.5g/l まで、アスコルビン酸1.0g/lまで、酒石酸3.5g/lまでは、阻害しません。
【最小検出限界】
最小検出限界は最小酢酸検出濃度でゼロと区別されています。酢酸を含まない試料を20回測定し、その標準偏差値を3倍した数値に相当します。
【相関】
E-液状キット 酢酸(y)と市販の用手法テスト(x)の比較(26サンプル)ではy=0.947x+7.4g/l r=0.991の結果が得られました。
【データ】
正確性
正確性 | n | 平均値 [mg/l] |
SD [mg/l] |
C [%] |
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赤ワイン | 20 | 459 | 2.71 | 0.59 |
白ワイン | 20 | 155 | 1.86 | 1.20 |
酢酸溶液 | 20 | 98 | 1.53 | 1.56 |
日差変動
日差変動(5日間) | n | 平均値 [mg/l] |
SD [mg/l] |
C [%] |
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酢酸 204mg/l | 20 | 208 | 7.01 | 3.37 |
酢酸 108mg/l | 20 | 107 | 4.12 | 3.85 |
酢酸 301mg/l | 20 | 306 | 8.08 | 2.64 |
赤ワイン | 20 | 569 | 9.31 | 1.64 |
白ワイン | 20 | 214 | 5.49 | 2.56 |
発泡ワインの回収率は、下記の表の通りです(ワイン:酢酸液=9:1)
回収率n=5 | 平均値 [mg/l] |
定濃度 [mg/l] |
回収率 [%] |
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9+1: 白ワイン1+500mg/l |
56 | 53 | 106 |
9+1: 白ワイン1+1000mg/l |
106 | 100 | 106 |
9+1: 白ワイン1+2000mg/l |
214 | 200 | 107 |
9+1: 赤ワイン1+500mg/l |
51 | 53 | 96 |
9+1: 赤ワイン1+1000mg/l |
96 | 100 | 96 |
9+1: 赤ワイン1+2000mg/l |
189 | 200 | 94 |
9+1: 赤ワイン2+500mg/l |
54 | 53 | 102 |
9+1: 赤ワイン2+1000mg/l |
100 | 100 | 100 |
9+1: 赤ワイン2+2000mg/l |
199 | 200 | 99 |
9+1: 白ワイン2+500mg/l |
54 | 53 | 102 |