F-キット ラフィノース

食品及び一般分析用試薬キット

F-キット ラフィノース　製品情報

オーダーインフォメーション

カテゴリ 糖質
製品番号 428 167 製品名 F-キット ラフィノース
包装単位 32回 希望価格 価格表ダウンロード
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UV テスト

精糖製品、大豆、穀類粉などの食品、生体試料中のラフィノース、D-ガラクトースの測定。

分析物

ラフィノースはD-ガラクトース、D-グルコース、D-フルクトースより成るトリサッカライドです。

甜菜に相対的に高濃度で存在し、また大豆などの他の植物にも存在します。食品油の存在は混ぜ物、例えば大豆製品の許可されていない添加などの間接的証明となります。

原理


特異性

α-ガラクトシダーゼはラフィノース以外に、ガラクチノール、メリビオース、スタキロースなどの、他のα-ガラクトシドを加水分解します。

乳糖などの、β-ガラクトシド結合を持つ基質は加水分解せず、高い濃度で存在しても測定には干渉しません。

ガラクトース脱水素酵素はD-ガラクトースに加えL-アラビノースを酸化します。少量の遊離のD-ガラクトースとD-アラビノースは、化学的、酵素的反応により天然のグリコシド結合から遊離する場合のみ、食品中に存在します。

感度と測定限界

測定感度は試料量（v）が0.500mlの時の0.005吸光度に基づいています。これは（340nm）で測定した際の約3㎎/l（試料溶液）のラフィノース濃度及びに約1㎎/l（試料溶液）のD-ガラクトース濃度相当します。

ラフィノースに関しては5㎎/l、D-ガラクトースは2㎎/lの測定限界は、最大試料量（v）が0.500mlの時の吸光度変化量0.010（340nm）に由来します。

直線性

測定の直線性は3μgラフィノース＋D-ガラクトース/アッセイ（5mg ラフィノース＋D-ガラクトース/試料溶液：v=0.500mI）から250μgラフィノース+D-ガラクトース/アッセイ（2.5gラフィノース+D-ガラクトース/試料溶液：v=0.100ml）の間にあります。

正確性

D-ガラクトースの測定で一つの試料を二重測定した場合、0.005から0.010の吸光度の違いが起きます。

ラフィノースの測定（D-ガラクトースの存在下）で一つの試料を二重測定した場合、0.010から0.015の吸光度の違いが起きます。
標準偏差値は測定範囲内で1～3％です。

ミルク及び乳製品の分析（3）：

D-ガラクトース：
ｒ=0.10x(content D-ガラクトース in g/100g)g/100g
R=0.12x(content D-ガラクトース in g/100g)g/100g

キット内容

  1. クエン酸バッファー.pH4.5. 約28mg NAD
  2. 約36U α-ガラクトシダーゼ
  3. ニリン酸カリウムバッファー.pH8.6
  4. 約30U Ga1-DH

試料調製の一般的情報

  • 透明で、無色の実際的に中性の液体試料を直接、あるいは希釈後液量0.500mlまで使用してください。
  • 濁った溶液はろ過してください。
  • 二酸化炭素を含む試料は脱気(ろ過などで)してください。
  • 固形、半固形試料は砕くか、ホモジナイズし、水で抽出するか溶解してください。
  • 脂肪を含む試料は温水で抽出してください。
  • エマルジョンはCarrez試薬で破壊してください。

参考文献

  1. Bergmeyer, H.U., Bernt, E. & Gutmann, I. (1974) in Methods of Enzymatic Analysis (Bergmeyer, H.U., ed.) 2nd ed., vol. 3, pp. 1172-1175, Verlag Chemie, Weinheim/Academic Press Inc., New York and London
  2. Kurz, C. & Wallenfels, K. (1974) in Methods of Enzymatic Analysis (Bergmeyer, H.U.,ed.) 2nd ed., vol.3, pp. 1180-1184 and 1279-1282, Verlag Chemie, Weinheim/ Academic Press Inc., New York and London
  3. Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach§35 LMBG, Untersuchung von Lebensmitteln: Bestimmung des Lactose- und Galactosegehalts von Milchprodukten (L 02.00-9/November 1983)
  4. Schiweck, H. & Büsching, L. (1969) Die enzymatische Bestimmung des Raffinose- und Galactinolgehaltes in Zuckerfabrirksprodukten über die bei der Spaltung- entstehende Galactose mit Hilfe von Galactose- Dehydrogenase, Zucker 22, 377-384
  5. Schiweck, H. & Büsching, L. (1975) Die enzymatische Bestimmung des Raffinosegehaltes in Zuckerfabriks- produkten über die bei der Spaltung entstehende Galactose mit Hilfe von Galactose-Dehydrogenase, Zucker 28, 242-243
  6. Hollaus, F., Wieninger, L. & Braunsteiner, W. (1977) Erfahrungen mit der enzymatischen Raffinose- Bestimmung mittels Galactose-Dehydrogenase in Rüben und Zuckerfabriksprodukten, Zucker 30, 653-658