E-キット Liquid ショ糖/D-グルコース

自動分析装置等適用及び用手法キット [ 液状試薬、スタンダード別売 ]
食品およびその他の試料中のショ糖/D-グルコースの吸光度定量用試薬
総量測定用（分別定量にはE8140も必要です）

E-キット Liquid ショ糖/D-グルコース　製品情報

オーダーインフォメーション

カテゴリ 糖質
製品番号 E8180 製品名 E-キット Liquid ショ糖/D-グルコース
ENZYTEC Liquid Sucrose/D-Glucose
包装単位 50回 測定用 希望価格 価格表ダウンロード
測定法 UV法 保存方法 要2～8℃保存
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F-キット(139041)とE-キットLiquid(E8180+E8140)の比較-概要

製品 F-キット E-キット Liquid
製品番号 139041 E8180 および E8140
試薬容量 ２２ テスト 各50 テスト
測定原理 ▪ アッセイ１/ E8180：
ショ糖＋D-グルコースの濃度をβ-フルクトシダーゼ (Bfr)、ヘキソキナーゼ (HK)、グルコース-6-リン酸脱水素酵素 (G6P-DH) によって生成するNADH (340nmの吸光度) から求める。
Sucrose + H2O -Bfr→ D-Glucose + D-Fructose
D-Glucose + ATP-HK→ Glucose-6-Phosphate + ADP
G-6-P + NAD+- G6P-DH → Gluconate-6-P + NADH + H+

▪ アッセイ２/ E8140：
D-グルコースの濃度を HK、G6P-DHによって生成するNADH (340nmの吸光度) から求める。
D-Glucose + ATP-HK→ Glucose-6-Phosphate + ADP
G-6-P + NAD+- G6P-DH → Gluconate-6-P + NADH + H+
▪ ショ糖の濃度をアッセイ１/E8180 の測定値 (ショ糖＋D-グルコースの濃度) からアッセイ２/E8140 の測定値 (D-グルコースの濃度) を差し引いて求める。
定量値の計算 エンドポイントの吸光度からランベルト・ベールの式を用いて定量値を求める *1
試薬 ▪ Vial 1 = バッファー（粉末）
▪ Vial 2 = HK / G6P-DH (懸濁液)
▪ Vial 3 = Bfr (粉末)		 E 8180
▪ R1 = バッファー / Bfr (50 ml x 2本)
▪ R2 = HK / G6P-DH (12.5 ml x 2本)
E8140
▪ R1 = バッファー (50 ml x 2本)
▪ R2 = HK / G6P-DH (12.5 ml x 2本)
調製後の試薬の
安定性		 ▪ Vial 1 = 4 週間
▪ Vial 4 = 4 週間		 すべての試薬は調整済みの溶液で、開封後も安定
コントロール コントロールはキットに含まれる コントロールは別売
E8440 マルチ糖類スタンダード(低濃度)
測定手順
（標準法）		 上記PDF参照
直線性 1.5 g/L (試料 = 0.100 mL) 1.5 g/L (試料 = 0.100 mL)
LoD 1.8 mg/L 2.1 mg/L
(v = 1 mL, ΔA = 0.010)
LoQ 16.4 mg/L 14.1 mg/L
(v = 0.5 mL, ΔA = 0.050)
*1 Excelテンプレートを配布しています

E-キットLiquid ショ糖 / D-グルコース (E8180) のF-キットに対する評価

a) ラボでの評価手順
E-キットLiquidのバリデーションを行う場合、以下の手順にしたがってください：
▪ 同一の試料をF-キットショ糖/D-グルコースとE-キットliquid ショ糖/ D-グルコース (E8180、50テスト) を使って併行して測定する。
▪ 回収率を求めるには E-キットLiquidマルチ糖類スタンダード (低濃度) (E8440)を使用する。
▪ ラボで定めたQCサンプルがある場合、それを使って回収率を比較する。
▪ ルーチン測定している試料を対象に、50テストを使い切るまで両方のキットで測定する（方法間の比較）。
▪ 試料の前処理はF-キットで測定するときの方法で行い、調製した同一の試料を両方のキットで測定する。（試料量は100μL）
▪ 試料中での安定性による影響を避けるため、両キットによる測定は同時に行う。
（特に、アセトアルデヒド、酢酸、アンモニア、アスコルビン酸、エタノール、亜硫酸は試料中の安定性が問題となる。）
その他の項目（直線性、精度、再現性など）のバリデーションを行う場合、さらにキットを追加する必要があります。
b) R-Biopharm社内における評価結果
E-キットLiquid マルチ糖類スタンダード (低濃度) (E8440)を使って求めた回収率
▪ 回収率：100 ± 5 %
▪ 注意：この回収率は E-キットLiquidの仕様に定められた値であり、すべてのロットで保証されます。

さまざまな試料（ビール、チョコレート、フルーツジュース、アイスクリーム、ジャム、練乳、ワイン）を測定範囲内になるよう希釈して測定した。 両キットにおける測定値は良く相関し、相関係数は99.9% (Passing-Bablock fit)であった。 なお、相関係数は測定する試料によって異なることがあります。