E-キット D-グルコン酸

はじめに

本法は、ドイツ、およびスイスの食品法に収載されており、ALVAにより推奨され、DIN、ISO、GOSTにより承認済みです。

測定原理

装置条件

波長：340nm（NADPH）ε＝6.31×mmol^-1×cm^-1
光路長：1.00cm（ガラスまたはプラスティック・キュベット）
温度：室温（＋20℃～）
終量（反応液量）：3.040ml
測定対照：水
試料溶液：0.100～2.000ml試料溶液中1～120μgD-グルコン酸を含有

試薬

1．トリエタノールアミン バッファー pH約7.6、80mgの
　　 NADP、190mgのATP、および硫酸マグネシウム（
　　 安定性は包装ラベルを参照）からなる混合粉末を
　　 含有しています。内容物を31mlの蒸留水に
　　 溶解してそのまま使用します。
　　 溶液は4℃保存で1ヶ月間、－20℃保存では
　　 2ヶ月間安定です。

#2．約0.7mlの6PG-DH懸濁液（約160U）
　　 （硫酸アンモニウム液）
　　 （安全性は包装ラベルを参照）
　　 を含有しています。懸濁液をそのまま使用します。
　　 懸濁液をピペットで秤取する前にビンを
　　 注意深くゆっくり回転させ内容物を均一に
　　 分散させます。

#3．約0.7mlのGK懸濁液（約18U）
　　 （硫酸アンモニウム液）
　　 （安定性は包装ラベル参照）
　　 を含有しています。懸濁液をそのまま使用します。
　　 懸濁液をピペットで秤取する前にビンを
　　 注意深くゆっくり回転させ内容物を均一に
　　 分散させます。

追加（キット中には含まれません）

測定試験のコントロールとして、D-グルコン酸ナトリウム、あるいはグルコン酸カリウムのグルコン酸として0.6g/lの標準液を使用します。

D-グルコン酸/D-グルクロノ-δ-ラクトンの測定用試薬類はすべて、人に無害です。化学実験室における作業用一般安全性規則に準拠して、使用後は実験室廃棄物として処理できます。包装材料はリサイクルできます。

特長

1. 特異性：
   D-グルコン酸に特異的（D-グルクロノ-δ-ラクトンは測定条件では50分以内に加水分化されD-グルコン酸に変換される）です。市販のD-グルコン酸塩を測定した場合の含有量は、グルコン酸塩が遊離のグルコン酸を含む場合は100％以上の結果が期待されます。結果は相当する塩の分子量を使って計算します。
2. 感度：
   0.25mg/l（ΔA＝0.005;v＝2.000ml;V＝3.040ml）
3. 検出限度：
   0.5mg/l（ΔA＝0.010;v＝2.000ml;V＝3.040ml）
4. 直線性：
   1μg/測定（v＝2.000ml;V＝3.040ml）～120μg/測定（v＝0.100ml;V＝3.040ml）
5. 精度：
   　ΔA＝±0.005～0.010吸収単位（Abs.）
   　CV＝約1～2％
   加熱ポークソーセージ（最も細かくミンチした）:
   　r＝0.12 g/100gs（r）＝±0.004 g/100g
   　R＝0.014 g/100gs（R）＝±0.005 g/100g
   ミルク:
   　x＝0.362 g/100g r＝0.02 g/100gR＝0.08 g/100g
   フェタチーズ:
   　x＝2.57 g/100gr＝0.15 g/100g R＝0.26 g/100g

参考文献

1. Mollering, H. & Bergmeyer, H.U.（1967）Enzymatische BestimmungvonD-Gluconsaure in Lebensmitteln, Z.Lebensm.Unters.Forsch. 135, 198-204

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