タンパク質発現スクリーニングキット　融合タンパク質精製キット ColTrap

E-coliの分離に遠心でなく磁気ビーズを用います。
ハイスループットスクリーニング、自動化が可能になります。

タンパク質発現スクリーニングキット　融合タンパク質精製キット ColTrap

タンパク質発現スクリーニングキット　融合タンパク質精製キット ColTrap

Hyglos GmbHのColTrap E-coli分離技術によりタンパク質発現のハイスループットでのスクリーニングができます。

プラスミドの導入からタンパク質の発現までを自動で行うことが可能です。

手間のかかる遠心によるE-coliの分離を、ColTrapでは簡単な磁気ビーズによる分離に置き換えました。

これにより、一連の操作は液体の取り扱いだけになり自動化にも適用できるようになりました。

タンパク質発現スクリーニングキット　融合タンパク質精製キット ColTrapの仕様

  • ColTrap Proteinexpress
    ColTrap Proteinexpressは96ウェルフォーマットで、ウェルのサンプルを個別に扱うことができるので、
    タンパク質発現条件（誘導物質の濃度、時間）を一度にスクリーニングできます。
    ColTrap Proteinexpressは発現タンパク質を磁気ビーズを用いてハイスループットで精製する
    アプリケーションにも適合します。
    また、プラスミドDNAの精製法としても使うことができます。
  • ColTrap ProteinexpressではE-coilを80％以上回収します。
    タンパク質発現に一般的に使われるE-coliストレインにおける回収率は多くの場合80％以上です。
    細胞周期に関わらず再現性よくE-coliを分離できます。

タンパク質発現スクリーニングキット　融合タンパク質精製キット ColTrapグラフ

  • 96ウェル磁気セパレーター
    Hyglos GmbHの磁気セパレーターには24個（4行×6列）のNdFeB磁気ロッドが並んでいます。
    96ウェルマイクロプレートを乗せると、磁気ロッドに隣接する4つのウェル中の磁気ビーズは
    ウェル壁に引き寄せられて分離されます。
    ColTrapによるE-coil分離だけでなく、Ni-NTA磁気ビーズやストレプトアビジン磁気ビーズによる
    タンパク質精製にも適用できます。
  • ColTrap Proteinexpressによるタンパク質発現スクリーニング
  1. 96ウェル深底プレートの各ウェルに1mlのE-coli培養液を加え、タンパク質発現を誘導します。
  2. 細胞分離用バッファー100μlを1mlの培養液に加え、ピペットにより吸引吐出を繰り返して攪拌します。
  3. 細胞分離用磁気ビーズ懸濁液100μlを加え、ピペットにより吸引吐出を繰り返して攪拌します。
  4. 室温で5分間インキュベーションします。
  5. 磁気セパレーターの上にプレートを置き5分間放置します。
  6. 上清をピペットを用いて取り除きます。
  7. 50～100μlの電気詠動用バッファー※を加えます。
  8. ピペットにより吸引吐出を繰り返して攪拌します。
  9. プレートを95℃で5分間インキュベートしたのち、サンプルをSDSゲルにアプライして電気詠動を行い、タンパク質の発現を調べます。

※電気詠動用バッファー：5％グリシン、2.5％β-メルカプトエタノール1.5％SDS、
　　50mM TrisバッファーpH8;50μg/mlプロモフェノールブルーを含む

  • 発現タンパク質精製プロトコール
    ColTrapで分離したE-coli からHis-タグ、Strep-タグ融合タンパク質を非変性または変性条件で
    磁気ビーズを使って精製することができます。
    お気軽にプロトコールをご請求ください。

参考文献

  1. Analytical Bopchemisty.346(2005)77-84,Automated expression and solubitity screening of His-tagged proteins in 96-well format.Renaud Vincentelli, et al.
  2. Combinatorial Chemistry & High Throughput Screening,6(2003)755-87, Parallel and multiplexed bead-based assays and encoding strategies. Yingyongnarongkyl, et al.
  3. Automated expression and solubility screening of His-tagged proteins in 96-well format. Anal Biochem. 2005 Nov 1;346(1):77-84.
  4. Parallel and Multiplexed Bead-Based Assays and Encoding Strategies.Combinatorial Chemistry & High Throughput Screening, 2003, 6, 577-587. （外部リンク：IngentaConnect）

オーダーインフォメーション

製品番号 製品内容
311042 ColTrap Proteinexpress Mini（96ウェル×1回分）
滅菌済み96ウェル深底プレート　1枚
（ガス透過プレートフィルム付）
細胞分離用バッファー　12ml
細胞分離用磁気ビーズ　12ml
311043 ColTrap Proteinexpress Midi（96ウェル×5回分）
細胞分離用バッファー　60ml
細胞分離用磁気ビーズ　60ml
311044 ColTrap Proteinexpress Maxi（96ウェル×20回分）
細胞分離用バッファー　12ml
細胞分離用磁気ビーズ　12ml
311062 細胞分離用磁気セパレーター
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